
谷胱gan肽檢測探針細胞染色
簡要描述:
谷胱gan肽檢測探針細胞染色還原型谷胱gan肽(GSH)的亞細胞檢測和定位對于了解氧化還原態的調節、藥物的作用效應以及脫毒機制方面十分重要
產品時間:2026-04-16
ThiolTrace Violet 500 (glutathione detection reagent)
谷胱gan肽檢測探針
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格(元) |
ThiolTrace Violet 500 谷胱gan肽檢測探針 | MX5322-100T | 100T | 1486 |
ThiolTrace Violet 500 谷胱gan肽檢測探針 | MX5322-500T | 500T | 3586 |
產品描述
還原型谷胱gan肽(GSH)的亞細胞檢測和定位對于了解氧化還原態的調節、藥物的作用效應以及脫毒機制方面十分重要。有文獻報道不同細胞亞群在應對氧化應激時的GSH水平存在差異,因此,適用于流式細胞分析和自動化熒光檢測的GSH檢測探針的開發非常重要。比較于常用的GSH檢測探針:單溴二胺(mBBr,MX5315)、單氯二胺(mBCl,MX5318),以及Thiotracker™ Violet,ThiolTrace™ Violet 500是一款更明亮和更穩定的細胞內硫醇探針(Thiol probe),用于監測胞內硫醇。由于GSH代表細胞內的絕大多數游離硫醇,因此,ThiolTrace™ Violet 500能用來評估細胞內GSH的水平。
ThiolTrace™ Violet 500具有以下優勢:
j 比mBCl和其他常用的胞內硫醇染料(比如:Thiotracker Violet)至少明亮10×;在含生長因子的細胞培養基內,ThiolTrace Violet 500比Thiotracker Violet的熒光強度高10-100倍(見附圖I)。
k 能用紫外(UV)或405nm波長激發,最大發射波長~525nm(見附圖II)。
l 能用醛類固定和0.5% Triton X-100透化。
m 能用于多通路分析,包括細胞毒性研究。
n 兼容于各種稀釋溶液包括含血清的細胞培養基。
o 操作簡單,只需37℃孵育30min即可進入細胞內;
p 適用于多種檢測方法,包括:流式細胞術、HCS成像和落射熒光顯微鏡。
本品以溶于500×的DMSO儲存液形式提供。以MX5322-100T包裝為例,用于熒光顯微鏡檢測,按照200μl工作液/孔,可以做100個孔。用于流式分析,按照500μl/次,可以做40次。
保存與運輸方法
保存:≤-20℃避光干燥保存,6個月有效。
運輸:冰袋運輸。
注意事項
1) 整個染色過程中需注意避光。
2) ThiolTrace™ Violet 500(500× in DMSO)在4℃,冰浴等較低溫度下會凝固而粘附在離心管官底、管壁或管蓋內,可將置于25℃水浴溫育片刻直至全部融解后使用。對于微量液體,每次使用前低速離心使得液體全部沉降至管底,再開蓋使用。
3) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
一、試劑準備
j 于實驗前,將低溫保存的500×儲存液置于室溫回溫至少20min使其完quan融化。
k低速離心3~5min,使其完quan沉淀置管底。
l于超凈臺內開蓋取用。初次使用,需根據單次用量分裝,置于-20℃避光密封干燥保存,避免反復凍融。
二、工作液準備
于實驗前,取1μl ThiolTrace Violet 500儲存液(500×)加入500μl生理緩沖液(比如:HBSS、HHBS),充分混勻,即得到所需的染色工作液,染色工作液現配現用;
【注】:也可以用不含血清的細胞培養基來配制染色工作液。
三、操作流程(96孔板熒光成像,黑框透明底板)
3.1 如有需要,用待測化合物處理細胞(細胞密度:5×105~1×106細胞/孔)一段時間,去除培養基。
【注】:適宜的處理時間因細胞類型和細胞密度的不同而有差異,每次實驗都推薦優化處理時間。
四、操作流程(流式分析)
4.1 如有需要,用待測化合物處理細胞(細胞密度:5×105~1×106細胞/孔)一段時間。
【注j】:適宜的處理時間因細胞類型和細胞密度的不同而有差異,每次實驗都推薦優化處理時間。
【注k】:對于貼壁細胞,用0.5mM EDTA處理細胞使其漂浮以維持細胞完整,染色前用含血清的培養基清洗細胞一次。
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貨號 | 名稱 | 規格 |
MX5322-100T | ThiolTrace Violet 500 (glutathione detection reagent)谷胱gan肽檢測探針 | 100T |
MX5315-10MG | Monobromobimane (mBBr) (Thiol-reactive dye)單溴二胺(硫醇反應性染料) | 10mg |
MX5316-25MG | ABD-F (Thiol Dye)硫醇標記染料 | 25mg |
MX5317-25MG | Fluorescein-5-maleimide (Thiol Dye)熒光素-5-馬來酰亞胺(硫醇標記染料) | 25mg |
MX5318-10MG | Monochlorobimane (mBCl) (Thiol Dye)單氯二胺 | 10mg |
附圖I. ThiolTrace Violet 500與Thiotracker Violet的染色效果圖
圖1. 含細胞培養基的Jurkat細胞分別用ThiolTrace Violet 500與Thiotracker Violet標記。染色流程:Jurkat細胞于37℃,5% CO2培養箱中用ThiolTrace Violet 500與Thiotracker Violet孵育20min。用流式細胞儀(Pacific Orange通道)測定熒光值。
附圖II. ThiolTrace Violet 500的光譜圖
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
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